大腸埃希氏菌O157:H7/Nm生化鑒定

產品名稱：EasylD大腸埃希氏菌O157:H7/NM生化鑒定試劑盒

英文名稱：EasylD Biochemical Identification Kit for Escherichia coli O157:H7/NM

包裝規(guī)格：10測試/盒

產品編號：HKI006

產品簡介：本試劑盒基于一步加樣技術，用于大腸埃希氏菌O157:H7/NM的生化鑒定(GB4789.36)。

產品組分：
      主要組分：EasylD大腸埃希氏菌O157:H7/NM生化鑒定條10條、半固體瓊脂10瓶、氧化酶試劑1瓶。
      其它組分：懸浮培養(yǎng)基10瓶、麥氏比濁管1瓶、靛基質試劑1瓶、 無菌液體石蠟1瓶、VP試劑甲液1瓶、VP試劑乙液1瓶、 甲基紅試劑1瓶、記錄表1冊、產品說明書1份。

儲存條件與保質期：2?8°C保存，有效期見試劑盒外標簽。

使用指南：
      1，從選擇性平板上挑取可疑單菌落（需預先確保增菌和分離均符合大腸 埃希氏菌O157:H7/NM典型特征）接種于營養(yǎng)瓊脂或TSA平板進行純化；
      2，取鑒定條、懸浮培養(yǎng)基、半固體瓊脂，使用前平衡至室溫；開啟半固體瓊脂；
      3，挑取經純化的分離株新鮮菌苔于懸浮培養(yǎng)基中，制成0.5麥氏濁度的均一菌懸液；同時接種同一菌株于三糖鐵瓊脂（需另外購買）和半固體瓊脂中；
      4，取小塊潔凈濾紙（需自備），滴加1滴氧化酶試劑，用無菌玻棒或塑料接種環(huán)挑取同一可疑菌落并涂于紙片上，30秒內觀察濾紙片顏色， 按表3并對照比色卡記錄結果，用完旋緊瓶蓋并放回試劑盒并置于2?8°C保存；
      5，從底座上取下鑒定條，并從鑒定條右側向左掀開貼膜，用移液器小心注入2mL菌懸液于分液槽中（避免使菌液提前流入反應孔），貼回貼膜，并依次抬起左右兩側數次，使菌懸液液面達同一高度，然后水平托起分液槽端，確保菌液流入各反應孔中，貼緊薄膜并放回底座。 再次從右側掀開貼膜，向第6、7、8號孔中各滴加3?4滴無菌液體石蠟，貼緊薄膜；
      6，將接種的鑒定條和反應管置于36°C±1°C培養(yǎng)養(yǎng)（培養(yǎng)時間按表3）；培養(yǎng)完畢, 記錄三糖鐵瓊脂培養(yǎng)結果，按表3并對照比色卡讀取鑒定條第1、3~8孔情況并記錄結果；取下鑒定條并置于365nm紫外燈下，觀察第2孔是否有藍色熒光，然后取出鑒定條置自然光下，掀開貼膜，分別向第9孔滴加2滴靛基質試劑，向第10孔逐滴滴入3滴VP試劑甲液和2滴VP試劑乙液，向第11孔小心滴加1滴甲基紅試劑，不貼緊貼膜，反應孔透氣10min后，記錄結果； 
      7，綜合菌落形態(tài)和GB4789.36大腸埃希氏菌O157:H7/NM生化試驗反應結果（見表2 ）進行判讀。

注意事項：
      1，需要使用者自備的試劑及用品有：三糖鐵瓊脂、潔凈濾紙、微量移液器及無菌吸頭、生化培養(yǎng)箱等；
      2，所含懸浮培養(yǎng)基為本試劑盒專用，不可替換或用于其他試驗；
      3，反應名稱加上劃線表示接種后培養(yǎng)前需添加配套試劑，反應名稱加下劃線表示培養(yǎng)結束后添加配套試劑；
      4，甲基紅試劑流動性強，滴加該試劑時應特別小心，防止試劑滴入其他的反應孔；未用完的配套試劑應旋緊瓶蓋放回包裝盒中并置于2?8°C下保存；
      5，向分液槽中加入菌液后，盡量分散均勻；極個別情況有反應孔分液量接近于100μL，但不影響反應結果；
      6，為避免污染，務必在超凈工作臺或生物安全柜中進行接種和添加配套試劑，培養(yǎng)前務必貼緊貼膜；
      7，如果鑒定條已過期，或鋁箔袋破損，請勿使用；
      8，本說明書需重復使用，請妥善保管。

廢物處理：帶菌的鑒定條、吸頭和懸浮培養(yǎng)基等試驗材料應置121 °C下濕熱滅菌 30min之后，按醫(yī)療垃圾相應的處理方式處理。

執(zhí)行標準：QS/BHK 0002-2020 Easy ID生化鑒定試劑盒

參考文獻：GB 4789.36 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 大腸埃希氏菌O157:H7/NM檢驗