霍亂弧菌顯色培養(yǎng)基

【產(chǎn)品名稱】

    霍亂弧菌顯色培養(yǎng)基

　 【用途】

　　霍亂弧菌顯色培養(yǎng)基用于水產(chǎn)品及食物中毒樣品中霍亂弧菌的分離和鑒定。

　 【原理】

　　蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;蔗糖為可發(fā)酵的糖類;抑菌劑抑制大部分非霍亂弧菌細(xì)菌，氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;色素與霍亂弧菌所具有的酶發(fā)生特異性反應(yīng)，水解底物，釋放出顯色基團(tuán)，在淡黃色平板上產(chǎn)生綠-藍(lán)綠色的菌落。

   【配方】

　　霍亂弧菌顯色培養(yǎng)基配方(每升)：

　　蛋白胨      15g

　　酵母膏粉     5g

　　蔗糖        10g

　　氯化鈉       5g

　　抑菌劑       5g

　　瓊脂        13g

　　色素        3.1g

　　終pH      9.0±0.2

　 【使用方法】

　　1、取瓶內(nèi)干粉56.1克，用100ml蒸餾水或純水溶解，可按比例擴(kuò)增或縮小。攪拌加熱煮沸至*溶解，不需高壓滅菌，冷至約50℃，傾注滅菌平皿。

　　2、以無菌操作取檢樣25 g(mL)，加入堿性蛋白胨水225 mL，用旋轉(zhuǎn)刀片式均質(zhì)器以8 000 r/min均質(zhì)1 min，或拍擊式均質(zhì)器拍擊2 min，制備成1:10的均勻稀釋液。如無均質(zhì)器，則將樣品放入無菌乳缽中磨碎，然后放在500 mL的滅菌容器內(nèi)，加225 mL堿性蛋白胨水，并充分振蕩。

　　3、增菌：將上述1:10稀釋液于36 ℃±1 ℃培養(yǎng)6h～8h，如有需要可進(jìn)行二次增菌。

　　4、分離

　　在增菌液中用接種環(huán)取一環(huán)，于霍亂弧菌顯色平板上劃線分離，于36 ℃±1 ℃培養(yǎng)18 h～24 h。

　　5、通過驗證試驗進(jìn)一步確認(rèn)假定性霍亂弧菌，如氧化酶、革蘭氏染色等。

　　【質(zhì)量控制】

　　 本品傾注平皿后呈淡黃色，下列菌株接種后36±1℃培養(yǎng)18-24小時生長情況如下表:  

　　注：后的鑒定須做補(bǔ)充試驗。

　　外觀：

　　脫水培養(yǎng)基：淺黃色具流動性粉未。

　　制備好平板：淡黃色的膠。

　　儲存條件和保質(zhì)期：

　　脫水培養(yǎng)基：10-30℃，保質(zhì)期二年。 制備好平板： 2-8℃，多保存兩周。

　　結(jié)果判斷